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如果PCR产物可以直接用来测序，但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒，还要进行连接转化 我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段。如果直接测序和经过连接转化后测序两者比较起来有什么优缺点？会影响结果的真实性吗？ 休 闲 居 编 辑 >>>>>>>>休闲养生网回答： 楼上说的是一方面。 PCR产物测序也是可以的，可以送粗样，也就是不纯化的，也可以送纯化好的。 但很多公司测的不是很好，所以一般建议转到克隆载体中保存了送菌液或质粒测序。 PCR产物纯化是去除多余的dNTP和引物二聚体。用纯化好的片段连接转化可以降低背景，提高转化效率。通常转化后我们用几种方法来确认转化子，抽质粒酶切是比较可靠的。选择酶切大小与预计一致的克隆去测序。 |